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　　摘要：肿瘤中存在肿瘤干细胞。肿瘤干细胞数目极少，却对肿瘤发生、转移起决定性的作用。肿瘤干细胞是一种特殊类型的干细胞，具备高度增殖能力与自我更新能力，可以多向分化为包括肿瘤细胞在内的各种细胞。肿瘤干细胞的存在及其作为肿瘤形成、生长和转移基础的观点已得到广泛认同。近些年来在该领域已取得了许多进展，但仍存在一些亟待解决的问题，如肿瘤干细胞的鉴定、生物学功能及作用机制等肿瘤干细胞的研究现状doc。

　　干细胞是存在于动物和人的一种特殊功能细胞, 具有多种分化能力和自我更新能力。肿瘤干细胞（Tumor stem cell，TSC）是一种特殊类型的干细胞，具备高度增殖能力与自我更新能力，也具备多向分化的潜能。其职责是维持肿瘤干细胞数目稳定并产生肿瘤。[1]近几年来，肿瘤干细胞的研究已经成为热点，在多种肿瘤组织中发现并鉴定了肿瘤干细胞。文章对肿瘤干细胞的来源、分离、鉴定及其临床意义进行了阐述。

　　目前,对于肿瘤干细胞的来源有不同的观点。第一种观点认为肿瘤干细胞来源于正常干细胞转化。有研究发现, 白血病干细胞样细胞可能是从多种不同的白血病细胞亚群获得的, 它们分别表达着与造血干细胞不同分化阶段相似的细胞表面标记物, 这表明肿瘤干细胞可能来源于正常造血干细胞的转化。[2]而且肿瘤干细胞与正常干细胞之间的许多相似点提示，肿瘤干细胞很可能是由正常干细胞直接转化而来的。实验证实正常造血干细胞表型为CD34+CD38–Thy-1+，而人类急性髓系白血病的肿瘤干细胞表型则为CD34+CD38-Thy-1ˉ，两者差别仅在于Thy 表达与否，因此Thy 未表达的前体细胞或干细胞有可能突变为肿瘤干细胞［3］。研究表明，在逆转录病毒作用下，正常造血干细胞会因为MLL2ENL 基因的变异，突变为恶性干细胞，引发白血病［4］。肿瘤的发生是正常细胞多次突变累积的结果，只有干细胞才具有足够的寿命累积突变形成肿瘤干细胞，从而引发肿瘤。[5]另外正常干细胞是体内唯一具有自我更新能力的细胞, 而且寿命长, 因此比成熟细胞更有可能累积足够的基因突变而转化为肿瘤干细胞。

　　第二种观点认为肿瘤干细胞由非干细胞转化。研究发现, MLL-AF9 融合蛋白能够将粒巨祖细胞转化为白血病干细胞[ 7] 。Jamieson 等发现, Wnt 信号通路失调使造血祖细胞具有自我更新能力, 导致慢性髓性白血病急性发作。所以说，某些分化细胞也可能在癌变之前重新获得自我更新能力，突变为肿瘤干细胞。

　　基于上述的两种理论，科学家们对肿瘤干细胞的可能形成机制的认识仅仅是局限于自己的研究领域，各自的实验结果与真正且全面的肿瘤干细胞形成机制是部分和整体的关系。肿瘤干细胞来源还有待于进一步大量而全面的研究。

　　目前国内外肿瘤干细胞一般的分离先制备成单细胞悬液，离心弃上清液后在无血清培养基上培养，为获得较好的培养效果，可以根据细胞的种类不同添加一种或几种生长因子。然后用荧光激活细胞分选法或磁性激活细胞分选法等分选出具有肿瘤干细胞表型或生物学特性的细胞，即肿瘤干细胞。

　　（1）荧光激活细胞分选法：也称为流式细胞仪分选法，通过荧光标记的特异性抗体，将表达肿瘤干细胞标志的细胞分离出来，即肿瘤干细胞。[8]流式细胞仪分选法是目前