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　　移植40天后，移植物在移植部位发生异常增殖并侵入肾实质，形成导 管、细胞团、血管等结构。

　　STZ 处理3天后所有NOD-Scid 小鼠出现高血糖，移植4天后小鼠 血糖水平下降至接近正常并保持稳定至40天，未移植的小鼠保 持高血糖。

　　（1）干细胞诱导分化的不彻底性有待解决。ICCs在正常小鼠体内的 异常增殖，反映 ICCs 中存在较多未分化细胞，如何控制诱导分化的 方向和纯度並有效抑制可能的恶性增殖是目前干细胞治疗研究碰到的 棘手问题。 （2）干细胞移植会不会致癌仍是有待解决的问题。‘肿瘤干细胞’ (cancer stem cell) 理论认为干细胞与癌细胞在增殖调节机制方面有 着相同的信号途径和调控因子，癌症可能起源于异常活化的干细胞。 ABCG2 是一种干细胞标志分子，同时又是多种癌细胞的抗药基因， 可能是联系干细胞和癌细胞的分子基础之一。

　　从 人 胎 胰 分 离 的 nestin 阳 性 细 胞 表 达 ABCG2，具有干细胞特性，在体外能诱导分化成有 功能的β 细胞，移植至糖尿病小鼠体内可产生胰 岛素、降低血糖水平。胰腺干细胞有着用作细胞 治疗的前景，但不少问题（安全性问题、免疫排 斥问题等）有待进一步研究，到临床应用还有一 段路要走。

　　类胰岛细胞团 (ICCs)异种体内移植 — 糖尿病的 干细胞治疗实验研究。

　　糖尿病小鼠模型制作 (腹腔注射链脲佐菌素 STZ ) 肾膜下移植 ICCs 治疗糖尿病

　　1, 糖尿病小鼠体内微环境对ICCs的定向诱导分化作用，可能 使糖尿病的干细胞治疗成为可能。

　　在体内诱导较体外彻底， β细胞比例高于体外，能显著降低糖尿病 小鼠血糖水平，说明糖尿病小鼠体内特殊环境有利于ICCs向β细胞分 化。

　　（1 ）糖尿病小鼠的血清可作为胰腺干细胞体外培养的诱导因子， 其中高浓度葡萄糖和胰高血糖素样肽1 (GLP-1)起主要作用。 （2 ）移植部位血管增生，为生长和分化提供营养並有利于胰岛素 及时进入血液循环。

　　 iPS干细胞建立的简单过程  iPS干细胞建立的过程主要包括：  （1）分离和培养宿主细胞；  （2 ）通过病毒介导或者其他的方式将若干多个多能性相关的基因导 入宿主细胞；

　　 （3）将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并于ES细胞专用培 养体系中培养，同时在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进 重编程；

　　胚胎干细胞主要是指来自囊胚内细胞团的细胞， 有自我更新和多向分化潜能，可以分化为内、中、外 三个胚层的各类细胞。

　　 Douglas Melton和他的同事用人体干细胞创 造了成熟β cells,并将其移植到糖尿病小鼠  身体内。  结果在两周内小鼠的糖尿病症状有所缓解。  挑战：1型糖尿病是一种自身免疫性疾病,所  以移植细胞仍然是容易受到攻击。  目前的研究进展：通过免疫移植剂来阻断自  身免疫系统对移植细胞的攻击，从而使移入

　　胚胎干细胞 诱导分化成 β 细胞 细胞移植 基因导入使其表达胰岛素 细胞移植 胰腺干细胞 诱导分化成 β 细胞 细胞移植

　　疾病发病机制 干细胞治疗机制 提供外源性干细胞； 刺激内源性干细胞； 分化－结构重建

　　成体干细胞是处于干细胞状态的成体细胞，包括 成年和未成年动物组织中的各种干细胞，因此又称为 组织干细胞。如神经干细胞双赢彩票、 造血干细胞 、 骨髓间 质干细胞、上皮干细胞 、肝干细胞、胰腺干细胞等。

　　 ES 细胞是目前研究最广泛、最成 熟的干细胞体系。自 2009 年起， 全球共批准了 3项人 ES（hES） 细胞的临床试验，标志着 hES 细 胞向临床应用迈出了重要的一步。 然而，hES 细胞.临床应用面临的 一个瓶颈问题是免疫排斥反应。 体细胞核移植（ SCNT ）技术能 够制备携带患者基因型的 hES 细 胞，可解决免疫排斥的难题。 2013 年，美国 Mitalipov 研究团 队将人类皮肤成纤维细胞核移植 到供体去核卵细胞中，成功建立 了 SCNT 的hES 细胞，标志着治 疗性克隆又向前迈出关键性的一 步。然而，hES 细胞建系必须摧 毁人类早期胚胎，故存在剧烈的 伦理学争议。此外，hES 细胞来 源的分化细胞移植到体内存在发 展为肿瘤的潜在风险。

　　I 型糖尿病是一种自身免疫性疾病，自身β细胞被自 己的 T 细胞误认为 异已细胞而遭受免疫攻击。因此即使 自身的干细胞移植，可以避免异体免疫排斥，可能仍会遭 遇自身免疫反应。

　　 （4）出现ES样克隆后进行iPS干细胞的鉴定（细胞形态、表观遗传学、 体外分化潜能等方面）。  （5）非致死性外界刺激（如物理压缩，去除细胞膜上细菌毒素等，

　　 采用体细胞重编程技术 可从患者自体细胞获得 的 iPS 细胞，这不但可 解决免疫排斥的难题， 而且避免了 hES 细胞和 SCNT 研究存在的伦理 学争论。

　　根据来源的不同，干细胞 可分为胚胎干（ES）细胞、 诱导性多潜能干（iPS）细 胞及成体干细胞。 不同种类的干细胞具有各 自的优势和不足。

　　人胎胰腺 nestin 阳性细胞的分离、体外培养和 生物学特性检测（目的是确认 NIPs是胰腺干细 胞）；