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　　近年来人们对干细胞的认识逐渐增加， 当知道干细胞具有独特的分化潜能， 能治愈 组织难以自愈的创伤， 能治疗临床上难以治 愈的疾病， 甚至可以使人返老还童， 让青春 永驻时， 人们便开始企盼着干细胞时代的到 来。本文就干细胞近年来在其生物学特性及 临床应用方面的进展做一综述。

　　基因治疗对于原发性免疫缺陷疾病在 治疗学上有广阔的前景。鼠类逆转录病毒载 体是目前被批准用于人类基因治疗的惟一 一种逆转录病毒。通过移植转染的 ＨＳＣｓ 对 动脉粥样硬化疾病进行基因治疗 ， 尽管这种 治疗方法已经在动物模型中初见成效， 但是 最近发现在一些进行临床基因治疗的 Ｘ－ 连 锁严重复合免疫缺陷患者中发生了白血病 转化现象， 说明将这种技术应用于人类还不 够成熟， 需要探索研究出新的、 安全的载体 ［７］。 慢病毒载体是一种有效的感染 ＨＳＣｓ 和进行 基因治疗的工具［８］。周毅等［９］研究小鼠干细胞 病 毒 （ＭＳＣＶ）介 导 外 源 甲 状 旁 腺 功 能 低 下 症

　　［６］ 刘 星 霞 ， 缪 兵 ， 李 府 ， 等 ． 胚 胎 干 细 胞 诱 生 的 胰 岛 素 分 泌

　　２００４ ， ｌ２（８）： ｌ８５３￣ｌ８５６． ［７］ 刘 福 云 ， 胡 廷 泽 ． 基 因 治 疗 在 神 经 干 细 胞 研 究 中 的 应 用 ．

　　干细胞在细胞替代治疗方面的研究正 处于飞速发展期。如刘星霞等 ［６］用小鼠胚胎 干细胞（ ＥＳ－ Ｄ３） 诱导生成的胰岛素分泌细胞

　　达 低 ， 但 一 般 的 成 体 干 细 胞 不 表 达 ； ３． 细 胞 融合， 移植的细胞与不同谱系的宿主细胞自 发融合， 导致遗传信息的转移， 形成的杂合 细胞遗传了两个亲代细胞的特征， 如 Ｔｅｒａｄａ

　　鉴 可 ［５］ 姜 铧 ， 张 洹 ． 间 质 干 细 胞 来 源 、 定 干细胞生物学特性及临床应用的研究进展、 塑 性 和 应 用 前 景 ． 暨南大学学报 （医学版 ）， ２００４ ， ２５ （ ４ ） ： ４６８￣４７３．

　　干细胞研究虽然有很大的进展， 但仍需 解决许多难题。 干细胞的分离、 纯化、 增殖、 １． 鉴定的问题： 这个问题是所有问题的起点， 如果没有扎实可靠的分离培养技术， 也就没 法进行后续实验研究。没有有效的增殖技 术， 就达不到细胞移植等治疗所需要的细胞 数量。干细胞的纯化及鉴定目前虽然研究很 多， 但由于许多干细胞没有独特的表面抗 原， 所以其鉴定问题将是一大难题， 需要各 国科学家们进一步研究。 ２． 干细胞诱导分化 的问题： 每种组织细胞产生的诱导条件不 同， 这就需要研究者们后续摸索前进。 移植 ３． 后免疫排斥反应： 干细胞治疗虽然有广阔的 应用前景， 但利用 ＥＳ 细胞移植或异体干细 胞移植治疗疾病过程中免疫相容性问题必 须解决。一种解决 ＥＳ 细胞移植排斥反应的

　　２．２ 成体干细胞的生物学特性 成体干细胞 （ ＡＳＣ） 是一类具有自我更

　　新， 高度增殖和多分化潜能的细胞群， 有横 向分化能力。目前国内外学者研究热点是其 横向分化能力。其机制还不清楚， 目前被大 家接受的观点主要有以下几种： １． 异质干细 胞的存在； ２．原始多能干细胞的持续存在。 美

　　殖能力。干细胞本身不是处于分化途径的终 端， 它可连续分裂几代， 也可在较长时间保 持静止状态； 干细胞通过两种方式生长， 一 种是分裂形成两个相同的干细胞， 另一种是 非对称分裂， 一个子细胞最终分化为功能细 胞， 另一个分裂成为干细胞保留下来； 干细 胞表现出很强的可塑性， 其调控机制目前尚 未清楚。

　　２．１ 胚胎干细胞（ ＥＳＣ） 的生物学特性 ＥＳ 细胞具有早期胚胎细胞相似的结构

　　特征， 有较高的核质比和正常的整倍体核 型。胚胎细胞在发育的不同阶段， 其细胞表 面出现不同的抗原。未分化的人 ＥＳ 细胞表 面 ＳＳＥＡ－ ３ 、 ＳＳＥＡ－ ４、 ＴＲＡ－ １－ ６０、 ＴＲＡ－ １－ ８１ 等呈阳性， 而未分化的小鼠 ＥＳ 细胞表面仅

　　干细胞在临床上主要应用在细胞替代 治疗、 基因治疗、 组织工程。但综合目前众多 的研究成果来看， 现在干细胞在临床上应用 尚不成熟， 处于起步阶段， 大多数的治疗性 研究尚处于动物模型治疗， 且疗效及重复性 不是十分理想。但由于干细胞独特的自我更 新及分化潜能， 相信不久的将来干细胞治疗

　　通过暂时服用免疫抑制剂， 然后逐渐停止服 药； 也可使用微胶囊法来阻止移植物与受体 免疫系统间的相互作用等方法。 ４． 干细胞治 疗中生物安全问题： 干细胞在移植到体内后 是否会分化成其他意料外的组织或引发其 他疾病， 这些都需要进一步的实验证实。其 他的如伦理学和社会问题等等， 需要学术界 与政府机构共同协作， 为干细胞的研究更上 一层楼而努力。 参考文献

　　干细胞是一类具有自我更新、 高度增殖 和多向分化潜能的细胞， 具有无限分裂能 力。根据干细胞分化阶段的不同， 大致分为 胚 胎 干 细 胞 （ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ， ＥＳＣ） 和 成 体干细胞（ ａｄｕｌｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ， ＡＳＣ） 。胚胎干细胞 主要包括受精卵分裂发育成囊胚时内层细 胞团， 以及从早期胎儿生殖嵴分离得到的胚 胎生殖嵴细胞， 这两种细胞均具有全能性， 可分化为各种类型的体细胞， 甚至可独立地 产生完整的机体。成体干细胞存在于成人的 各种组织中， 参与组织更新、 伤修复等过 创 程。它能进行“ 向分化” 或称其为“ 塑 横 可 （ 性” ， 即由一种组织的成体干细胞分化成其 ） 它组织细胞， 这种跨系或跨胚层分化现象称 为横向分化。目前研究较多的成体干细胞 有 ： 神 经 干 细 胞 （ ＮＳＣ） 、 血 干 细 胞 （ ＨＳＣ） 、 造 间 充 质 干 细 胞 （ ＭＳＣ） 、 皮 干 细 胞 、 干 细 表 肝 胞、 腺干细胞、 肌干细胞、 网膜干细 胰 心 视 胞、 角膜干细胞等。

　　ＳＳＥＡ－ １ 抗原阳性［１－ ２］。未分化的 ＥＳ 细胞表达 高 水 平 的 端 粒 酶 活 性 和 转 录 因 子 Ｏｃｔ－ ４ ， 碱

　　性磷酸酶染色呈阳性。胚胎干细胞的表面抗 原是指在胚胎干细胞未分化状态下高度表 达， 一旦分化， 基因迅速降调甚至关闭。这些 标记物加上干细胞时期细胞内碱性磷酸酶、 端粒酶的特异性高表达， 可成为鉴定胚胎干 细胞的依据。

　　・ ・ ４４ 括“ 结构性组织器官的组织工程” 代谢性 和“ 组织器官的组织工程” 结构性组织器官如 ： 软骨、 、 腱、 肤等； 代谢性组织器官如 骨 肌 皮 肝脏、 肾脏、 胰腺、 心脏等 。在组织工程中，

　　［１］ 赵 明 ， 任 彩 萍 ． 胚 胎 干 细 胞 诱 导 分 化 的 研 究 进 展 ． 生 命

　　研究最多的种子细胞是间充质干细胞织细 胞， 但最主要还是骨及软骨组织工程。孙骏 等 研究组织工程联合自体骨软骨柱移植修

　　复大面积骨软骨缺损， 并实现修复组织间的 整合， 以寻找一种适合临床应用的大面积骨 软骨损伤修复， 疗效满意。 ＥＳ 细胞由于其应 用存在伦理学上的问题， 受到各界人士的争 议， 但它的研究为人类带来的益处同样不容 忽视。其他的组织工程如组织工程皮肤在烫 伤、 烧伤等创面修复中已经得到了一定的应 用； 美国、 本已经开始用胚胎干细胞诱导 日 产生血管， 并进行批量生产； 上海第二医科 大学附属第九人民医院的医学专家们采用 体外培养角膜缘干细胞的方式， 构建角膜上 皮层， 移植治疗兔角膜缘损伤， 术后角膜透 明， 这项研究为临床治疗眼表疾病提供了理 论依据和实践经验。

　　（ＨＰＴ）， 基因可高效转导小鼠胚胎干细胞 （ＴＣ－ １）并 持 续 分 泌 甲 状 旁 腺 素 （ ＰＴＨ） ， 经 基 因 转 导的 ＴＣ－ １ 可 较 好 地 改 善 模 型 鼠 的 症 状 ， 是

　　目前许多科学家研究在体外以干细胞 为种子细胞培育成一些组织器官， 可用来替 换人体衰老和病变的组织器官。组织工程包

　　［２］ 胡 娅 莉 ， 徐 运 ， 崔 恒 宓 ， 等 ． 胚 胎 干 细 胞 的 研 究 进 展 ． 医 学

　　［３］ Ｊｉａｎｇ Ｙ， Ｊａｈａｇｉｒｄａｒ ＢＮ， Ｒｅｉｎｈａｒｄｔ ＲＬ， ｅｔ ａ１． Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｅｙ ｏｆ ｍｅｓｅｎｅｈｙｒｅａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａｄｕｌｔ ｍａｒｒｏｗ．Ｎａ－ ｔｕｒｅ ， ２００２ ， ４１８（６８９３）： ４１￣４９． ［４］ Ｔｅｒａｄａ Ｎ， Ｈａｍａｚａｋｉ Ｔ， Ｏｋａ Ｍ，ｅｔ ａｌ． Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｃｅｌｌｓ ａｄｏｐｔ ｔｈｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｆ ｏｔｈｅｒ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｃｅｌｌ ｆｕｓｉｏｎ． Ｎａｔｕｒｅ ， ２００２，４１６（６８８０）：４８５￣４８７．

　　发现小鼠的血糖水平明显下降， 但未降到正 常水平， 证实该细胞对 ＤＭ 具有一定的治疗 作用。用成体和胚胎干细胞治疗神经退行性 变的疾病， 尤其是治疗帕金森病越来越受到 人们的关注。日本京都大学研究帕金森病的 医学专家们将早期猴胚胎干细胞诱导分化 成神经元细胞， 然后植入有帕金森病症状的 猴子大脑内相关区域， 试验已经获得初步成 功。这表明， 移植胚胎干细胞用于治疗疾病 的确可行， 但这一方法还需要进一步改进。

　　异性表面抗原， 它不表达 ＣＤ３４、 ＣＤ１４、 ＣＤ４５， 只表达 ＳＨ２、 、 分化 ＳＨ３ ＣＤ２９、 ＣＤ１０６、 ＣＤ１６６。 功能检测法主要 是 通 过 观 察 ＡＳＣ 诱 导 分 化 是否能生成预期的细胞类型来反证是否该 种类型的干细胞： 如 ＭＳＣ 可诱导生成成骨细 胞及软骨细胞， 只要通过染色等方法证实诱 导生成的细胞是成骨细胞或软骨细胞即可 证明是 ＭＳＣ 细胞， 此法在目前的研究中用到 比较多。

　　分离培养和形态学观察； 免疫表型鉴定； 分 化功能检测。分离培养和形态学观察是最直 接简单的鉴别方法： 如利用间充质干细胞 （ ＭＳＣ） 在培养瓶中可贴壁生长的特点， 弃去 未贴壁细胞， 得到 ＭＳＣ 集落， 用显微镜观察 细胞形态来辨别细胞。免疫表型鉴定是目前 研究最多的， 虽然其特异性比较高， 但所需 的实验条件较高， 表面抗原试剂价格昂贵， 且由于大多数成体细胞没有独特的免疫标 记物， 只能通过排除其他细胞来确定是否为 目的细胞来识别鉴定： 只有造血干细胞具有 特异性的表面抗原 ＣＤ３４ ， 而 ＭＳＣ 就没有特

　　干细胞具有多种生物学特性， 最主要的 是具有自我更新和多向分化潜能及无限增

　　国的学者 Ｊｉａｎｇ Ｙ 等［３］提出成体骨髓中确实存 在一类被称为多潜能的成体干细胞（ ＭＡＰＣ） ，dLsct.com！